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花葉絡(luò )石
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花葉絡(luò )石的養殖方法
生長(cháng)與分化
1.
無(wú)菌材料的獲得
選取一年生幼苗生長(cháng)??;仕無(wú)病蟲(chóng)害的母株,切取當年萌發(fā)之春梢先端,去除葉片,保留葉柄,將枝條截成2—3cm的小段。消毒時(shí)先用10%洗衣粉溶液浸泡15min,然后用流水;中洗30min。在無(wú)菌條件下用75%乙醇溶液浸泡殺菌30 S, 用0.1%的升汞溶液加吐溫—20殺菌3、5、10、15min。0.1%升汞溶液滅菌效果隨殺菌時(shí)間延長(cháng)而提高,殺菌時(shí)間少于10min則無(wú)菌苗獲得率小于13.5%,殺菌15min”無(wú)菌苗獲得率為23.7%,外植體死亡率達33.3%。隨著(zhù)殺菌時(shí)間的延長(cháng)升汞對植物材料的毒害作用加劇,以0.1%升汞溶液殺菌時(shí)間10—15min為宜。用無(wú)菌水;中洗3—5遍后,接種到MS固體培養基上。
2.
芽的誘導
將接種后20d的無(wú)菌苗轉移至培養基(1)上,5—7d莖尖開(kāi)始萌動(dòng),10d腋芽萌動(dòng),芽逐漸長(cháng)大,繼續培養20d,莖段上所有腋芽均萌發(fā)成側枝。側枝生長(cháng)正常,葉片深綠色,莖基部愈傷組織較少,黃綠色。
3.
試管苗的增殖
將試管苗側枝分割成2—3芽為一段,接種于培養基(2)上。10d后莖段葉芽萌動(dòng),30d長(cháng)成大量側枝,并有大量雙生枝和三生枝產(chǎn)生。接種莖段形成具有5—8側枝的叢生苗,平均增殖5.8倍。試管苗節間明顯伸長(cháng),幼嫩葉片莖桿均呈淡紅色,葉片大,莖桿較粗,組織不充實(shí),莖基部愈傷組織大。以后每30d繼代1次,經(jīng)3—4次繼代試管苗出現玻璃化現象。
4.
壯苗培養
將經(jīng)增殖培養的試管苗每繼代3—4次后轉移至培養基(3)上。40d后形成大量側枝,平均每莖段4—6側枝,側枝平均長(cháng)1.8cm,平均增殖3.1倍?;緹o(wú)雙生枝或三生枝。側枝生長(cháng)??;D,組織充實(shí),葉色深綠,基部愈傷組織小,黃綠色,無(wú)玻璃化現象。
5.
根的誘導
將生長(cháng)健壯、長(cháng)度大于1.2cm的側枝分割,轉移至培養基(4)上。提高光照度至2500—3000lx,延長(cháng)光照時(shí)間至每天16h。培養15d后開(kāi)始有根原基形成,根原基形成后即可煉苗。20—25d調查生根情況,生根率73%,每苗平均生根l—2條。
6.
煉苗移栽
將生根試管苗帶瓶移人栽培溫室,培養1周。當根長(cháng)0.5—1 omb寸,打開(kāi)瓶蓋煉苗3—5d,將生根苗取出,洗凈根部培養基,栽植于育苗穴盤(pán)中。以黑泥碳為基質(zhì),溫度控制在20—25℃之間,濕度為85%—95%左右,20d即可成活,成活率達73%以上。
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